Precauções para autoclave

Precauções para autoclave

Princípio da autoclavagem

O princípio da esterilização em autoclave é: em um vaporizador fechado, o vapor não pode transbordar e a pressão continua aumentando, de modo que o ponto de ebulição da água continua aumentando, para que a temperatura na panela também aumente. Sob uma pressão de 0,1MPa, a temperatura na panela atinge 121°C. Sob esta temperatura de vapor, pode matar rapidamente todos os tipos de bactérias e seu princípio de alta resistência ao calor

Precauções:

Nota: Remova completamente o ar no pote para que todo o pote seja vaporizado e a esterilização esteja completa. Existem vários métodos diferentes de autoclavagem e ventilação, mas o objetivo é purgar o ar, tornar a temperatura da panela aquecida uniformemente e garantir a esterilização completa. O método comum é: feche a válvula de sangria, após ligar, quando a pressão subir para 0,05MPa, abra a válvula de sangria para liberar ar e, em seguida, feche a válvula de sangria depois que o ponteiro do manômetro retornar a zero. Após fechar a válvula e energizar, quando o manômetro subir para 0,1MPa, inicie a cronometragem e mantenha a pressão em 0,1~0,15MPa por 20 minutos.

 Após atingir o tempo de espera, a fonte de alimentação pode ser cortada. Quando a pressão cai para 0,05MPa, o vapor pode ser liberado lentamente. Deve-se tomar cuidado para não reduzir a pressão muito rápido, o que pode causar ebulição descompressiva intensa e transbordar o líquido no recipiente. Quando a pressão cai para zero, a tampa pode ser aberta, o meio de cultura pode ser retirado e colocado na plataforma para condensação. Não deixe o ar sair por muito tempo, o que fará com que a composição do meio mude, para que o meio não possa ser inclinado. Uma vez colocada por muito tempo, a tampa não pode ser aberta devido à pressão negativa na caldeira. Enquanto a válvula de liberação de ar estiver aberta, a pressão atmosférica está dentro, as pressões interna e externa são equilibradas e a tampa é fácil de abrir.

 Para itens que não se deterioram após a autoclavagem, como água estéril, meios de cultivo e equipamentos de inoculação, o tempo de esterilização pode ser estendido ou a pressão pode ser aumentada. O meio deve respeitar estritamente o tempo de retenção de pressão. É necessário manter a pressão completamente, mas também para evitar que os ingredientes no meio se deteriorem ou reduzam a eficácia. O tempo não pode ser estendido à vontade

Passos:

1. Primeiro retire o barril de esterilização interno e, em seguida, adicione uma quantidade adequada de água ao pote externo para nivelar a superfície da água com a prateleira triangular.

2. Coloque-o de volta no barril de esterilização e carregue os itens a serem esterilizados. Tenha cuidado para não embalar demais, para não atrapalhar o fluxo de vapor e afetar o efeito de esterilização. Nem o Erlenmeyer nem a ponta do tubo de ensaio devem ficar em contato com a parede do barril, para evitar que a água condensada encharque o papel de embrulho e penetre no bujão de algodão.

3. Cubra e insira a mangueira de exaustão na tampa na ranhura de exaustão do cilindro de esterilização interno. Aperte os dois parafusos opostos ao mesmo tempo de maneira simétrica dois a dois, para que o aperto dos parafusos seja consistente e evite vazamento de ar.

4. Use um fogão elétrico ou a gás para aquecer, e ao mesmo tempo abra a válvula de exaustão para fazer a água ferver para retirar o ar frio da panela. Depois que o ar frio estiver completamente exausto, feche a válvula de exaustão e deixe a temperatura na panela subir gradualmente à medida que a pressão do vapor aumenta. Quando a pressão no pote sobe para a pressão necessária, a fonte de calor é controlada para manter a pressão pelo tempo necessário. Este experimento usa 1,05 kg/cm2, 121,3 ℃, 20 minutos de esterilização.

5. Quando o tempo necessário para a esterilização terminar, corte a fonte de alimentação ou desligue o gás e deixe a temperatura no pote de esterilização cair naturalmente. Quando a pressão do manômetro cair para 0, abra a válvula de escape, solte o parafuso, abra a tampa e retire o artigo de esterilização. Se a pressão não cair para 0, abra a válvula de escape e a pressão no pote cairá repentinamente, fazendo com que o meio de cultura no recipiente saia correndo da boca do frasco ou tubo de ensaio devido ao desequilíbrio da pressão dentro e fora, fazendo com que o chumaço de algodão seja contaminado com o meio de cultura. Poluição.

6. Coloque o meio estéril removido em uma incubadora a 37°C por 24 horas. Após a inspeção, se não houver crescimento de bactérias, pode ser usado.